
Rinder -Tuberkulose -Antikörper -ELISA -Kit
Modellnummer: VD501E
Abbr.:BTB AB ELISA
Exemplar: Serum
Beschreibung
Spezifikation
Beabsichtigte Verwendung: Das ELISA -Detektionskit des Rinder -Tuberkulose -Antikörpers dient zur Bestimmung der Rinder -Tuberkulose
Probe: Serum
Materialien erforderlich, aber nicht bereitgestellt:

Testverfahren und Interpretation
Schritt 1Testverfahren
1.1 Vorbereitung der Lösung von Lösung
WEinstellungskonzentration wAsshing Flüssigkeit:Vor dem Gebrauch sollte die Waschlösung auf Raumtemperatur ({20-25 Grad) wiederhergestellt werden und gleichmäßig geschüttelt werden, um sie gleichmäßig zu machen. Dann verdünnen Sie das 20 -fache der konzentrierten Waschlösung mit gereinigtem Wasser (z. B. wird 5 ml konzentrierte Waschlösung zu 95 ml gereinigtem Wasser hinzugefügt), gut mischen und die verdünnte Waschflüssigkeit kann 7 Tage lang bei 2-8 Grad gespeichert werden.
1.2 Probenvorbereitung
① Ganzes Tierblut wurde genommen, 10 Minuten bei 4000 U / min zentrifugiert und der Überstand gesammelt. Serum kann auch ohne Hämolyse auf natürliche Weise koaguliert werden.
② Verdünnen Sie die Serumprobe 1: 100 (fügen Sie 2ul -Serumprobe zu 198ul -Probenverdünnung hinzu) und mischen Sie gründlich.
Hinweis: Negative und positive Kontrollen müssen nicht verwässert werden.
1,3 Enzymkonjugatvorbereitung
Verdünnen Sie das Enzymkonjugat 1: 200 (fügen Sie 5ul Enzymkonjugat (x100) bis 995ul Probenverdünnung hinzu) und mischen Sie gründlich.
1.4 Testverfahren
Nehmen Sie das Enzym -Kennzeichnungsmikroplate (gemäß der Anzahl der Proben, die Sie mehrmals verwendet und verwendet werden können), um das verdünnte Serum zum Enzym -Markierungsmikroplate zu 100ul hinzuzufügen, jeweils zwei Brunnen für negative und positive Proben einzustellen und jeweils 100ul für negative hinzuzufügen und positive Kontrollpersonen für die Reaktion gut. Schütteln Sie die Probe vorsichtig in den Brunnen mit dem Versiegelungsfilm, um die Platte abzudecken, und inkubieren Sie 30 Minuten lang bei 37 Grad.
② Öffnen Sie den Versiegelungsfilm, schütteln Sie die Lösung in der Platte gut ab, fügen Sie 300 µl Arbeitskonzentrationsflüssigkeit in jede Vertiefung hinzu und verwerfen Sie dann die Flüssigkeit in der Vertiefung. Wiederholen Sie die obigen Schritte 5 -mal und tupfen Sie schließlich trocken auf ein sauberes absorbierendes Papier.
③ 100 µl Enzymkonjugat an jede Vertiefung, bedecken Sie die Platte und inkubieren Sie ihn 45 Minuten lang bei 37 Grad.
④ Öffnen Sie den Versiegelungsfilm, schütteln Sie die Lösung in der Platte gut ab, fügen Sie 300 µl Arbeitskonzentrationsflüssigkeit in jede Vertiefung hinzu und verwerfen Sie dann die Flüssigkeit in der Vertiefung. Wiederholen Sie die obigen Schritte 5 -mal und tupfen Sie schließlich trocken auf ein sauberes absorbierendes Papier.
⑤Add 100 µl Substratlösung in jede Vertiefung, bedecken Sie die Platte und inkubieren Sie sie 10 Minuten lang bei 37 Grad vor Licht.
⑥Add 50 µl stoppen die Lösung für jede Vertiefung und bestimmen Sie das Ergebnis innerhalb von 5 Minuten.
Schritt 2 Ergebnisinterpretation
Der OD450 -Wert jedes Brunnens wurde auf dem 96- Well -Mikroplatten -Leser gelesen.
2.1 Validierung
Der durchschnittliche OD450nm -Wert der negativen Kontrolle war<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 Berechnungsmethode
Berechnen Sie für jede Probe das S/P wie folgt unter Verwendung der korrigierten Stichproben- und Kontrollwerte:
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2.3 Ergebnisinterpretation
Wenn s/p<0.25, it is judged as negative.
Wenn S/P größer oder gleich 0. 30, wird es als positiv beurteilt.
Wenn 0. 25 kleiner als oder gleich S/P.<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
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